磷酸化多肽單抗

                服務編號:YKMS-003          

                服務標準:
                    1.1-3株雜交瘤細胞株
                    2.每株細胞提供2-5 mg抗體
                    3.磷酸化多肽抗體ELISA效價大于80,000
                    4.磷酸化多肽與非磷酸化多肽效價區分大于16倍(ELISA、Dot Blot)

                服務內容:
                    1.多肽合成(磷酸化多肽10 mg,>85%;非磷酸化多肽10 mg,>85%)
                    2.多肽偶聯(KLH用于免疫,BSA用于檢測)
                    3.免疫6只 Bal b/c小鼠,每只小鼠4-5次免疫,小鼠血清Elisa效價達到1:10000以上
                    4.取血清效價最高的小鼠的脾細胞與SP2/0進行細胞融合
                    5.3-4次亞克隆后得到穩定分泌特異性抗體的雜交瘤細胞株
                    6.雜交瘤細胞株擴增/凍存
                    7.小鼠腹水制備,Protein G純化得到抗體 
                    8.抗體Elisa檢測效價,亞型鑒定

                最終交付的材料:
                    1.1-3株雜交瘤細胞株
                    2.每株細胞提供2-5mg Protein G純化的抗體
                    3.磷酸化與非磷酸化多肽各1mg
                    4. Elisa數據報告,亞型鑒定報告,完整項目報告

                Phosphor-peptide  → Monoclonal antibody 

                Service Including:

                      a.Peptide antigen design and preparation:

                         Peptide synthesis of up to 18 AA residues (20-30 mg) with a purity > 85%

                      b.Peptide conjugation:

                        Peptide conjugation to KLH and BSA

                      c.Immunization and serum titer test:

                         Pre-immune bleed

                         Six Balb/c mice immunization

                         Serum titer test

                      d.Fusion and Screening:

                         Fusion and Screening

                         Subcloning and cell expansion

                      e.Antibody production & purification:

                         Appropriate scale hybridoma cell culture

                         Purified by protein A affinity chromatography

                Customer to provide:

                       Peptide Sequence

                Delivery:

                      a.1-3 hybridoma cell lines; 

                      b.2-5 mg protein A purified mAb per cell line. 

                      c.mAb specific to phosphor-peptide: ELISA titer ≥80,000

                      d. mAb titer to phosphor-peptide/non-phosphor-peptide ≥16 (ELISA and Dot Blot)

                Time:

                      20-26 weeks

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